紫外可見(jiàn)分光光度計在生物學(xué)領(lǐng)域的應用

 紫外可見(jiàn)分光光度計在生物學(xué)的應用分析中, 常見(jiàn)的有蛋白質(zhì)含量檢測;一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測定。因為蛋白質(zhì)對紫外光的主要吸收波長(cháng)為280nm, 所以, 采用光度測量模式, 將儀器的波長(cháng)GOTO 到蛋白質(zhì)的zui大吸收峰波長(cháng)280nm 上, 測試其吸光度大小, 就可完成對蛋白質(zhì)的定量檢測。

目前, 紫外可見(jiàn)分光光度計的應用主要是在定量分析方面。先從生命科學(xué)領(lǐng)域的應用來(lái)介紹。紫外可見(jiàn)分光光度計在生命科學(xué)中應用非常廣泛。zui主要的是以下5 個(gè)方面。

1. 蛋白質(zhì)分析工作中的應用

紫外可見(jiàn)分光光度計在蛋白質(zhì)的分析中, zui主要的是作蛋白質(zhì)含量檢測;一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測定。因為蛋白質(zhì)對紫外光的主要吸收波長(cháng)為280nm, 所以, 采用光度測量模式, 將儀器的波長(cháng)GOTO 到蛋白質(zhì)的zui大吸收峰波長(cháng)280nm 上, 測試其吸光度大小, 就可完成對蛋白質(zhì)的定量檢測。

2. 核酸分析工作中的應用

紫外可見(jiàn)分光光度計在核酸分析中的應用, 主要是用來(lái)對核酸的定量檢測; 因為核酸的吸收峰在260nm。我們只要采用光度測量模式, 將紫外可見(jiàn)分光光度計的波長(cháng)GOTO 到核酸的zui大吸收峰260nm 上, 測試其吸光度大小就是了。

3. 氨基酸分析工作中的應用

紫外可見(jiàn)分光光度計在氨基酸分析中的應用, 主要是用來(lái)對氨基酸的定量檢測。因為氨基酸對紫外光的主要吸收波長(cháng)為230nm, 所以, 我們只要采用光度測量模式, 將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO 到氨基酸的zui大吸收峰230nm 上, 就可測試其吸光度大小, 從而計算出氨基酸的含量。但是, 因為氨基酸分析時(shí), 一般是將它溶解在水中, 而水在230 nm 附近有很多干擾吸收線(xiàn), 所以, 在用紫外可見(jiàn)分光光度計對氨基酸分析檢測時(shí), 要注意防止干擾的問(wèn)題。此外, 還需注意: 只有少數氨基酸有紫外吸收, 多數氨基酸無(wú)紫外吸收或很弱, 測定時(shí)要衍生化后再測。

4. 糖類(lèi)分析測試工作中的應用

紫外可見(jiàn)分光光度計在糖的分析中, 主要是作定量檢測。因為糖對紫外光的主要吸收波長(cháng)為218nm, 所以, 對糖類(lèi)進(jìn)行分析時(shí), 只要采用光度測量模式, 將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO 到氨基酸的zui大吸收峰218 nm上, 就可測試其吸光度大小, 從而計算出糖的含量。

5. 多糖分析測試工作中的應用

紫外可見(jiàn)分光光度計在多糖的分析中, 主要也是作定量檢測。因為多糖對紫外光的主要吸收波長(cháng)為206nm, 所以, 我們只要采用光度測量模式, 將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO 到多糖的zui大吸收峰206 nm 上, 就可測試其吸光度大小, 從而計算出多糖的含量。

但是多糖的分析難度很大。因為, 在206 nm 處的時(shí)候, 光源(氘燈) 的能量已經(jīng)很弱, 儀器光學(xué)系統的能量輸出也很低, 光電倍增管的靈敏度也很低, 206nm 左右的干擾也很大。所以, 用紫外可見(jiàn)分光光度計作多糖的分析是很難的事, 目前許多科學(xué)家正在研究中。