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    分光光度計有哪些限制性條件?
    更新時(shí)間:2020-02-18 點(diǎn)擊次數:2059
           分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是實(shí)驗室、科研機構、醫療、農業(yè)、食品廠(chǎng)、飲用水廠(chǎng)等機構*檢驗設備。已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。
      分光光度計的限制性條件主要表現為;通過(guò)溶液的光必須是平行的;通過(guò)溶液的光必須是單色光;待測溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過(guò)高,這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。
      但是在實(shí)際的分光光度計的制造和使用過(guò)程中這三個(gè)條件是不可能達到的。其一:因為光是直線(xiàn)傳播的,在分光光度計制造過(guò)程中,燈源發(fā)出的光是發(fā)散的,經(jīng)過(guò)聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過(guò)溶液的整體過(guò)程中,光是不可能平行的。其二:燈源發(fā)出的光是復合光,經(jīng)過(guò)狹縫,再經(jīng)過(guò)光柵分光等步驟,因為受到狹縫和光柵本身的限制,光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問(wèn)題,光度計不可能沒(méi)有其它的雜光存在。其三:用戶(hù)的溶液也不可能是純凈的,也會(huì )含有一些雜質(zhì),這些對光度的吸收都會(huì )存在影響。除以上三個(gè)方面的影響外,在實(shí)際的光度計應用過(guò)程中還會(huì )存在其他因素的影響,例如:
      1、經(jīng)過(guò)比色皿的光是否垂直;
      2、比色皿寬度是否為10mm的標準值;
      3、測試波長(cháng)是否準確;
      4、程序設計是否存在漏洞等等,都會(huì )直接影響到利用瑯伯-比爾定律計算出的結果。

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