紫外可見(jiàn)分光光度計是實(shí)驗室中十分常見(jiàn)的儀器之一，本文就紫外可見(jiàn)分光光度計在檢定中常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題進(jìn)行解析, 例如：在實(shí)驗中誤差的來(lái)源進(jìn)行分析與誤差的解決方法，還有儀器出現相關(guān)問(wèn)題（如：吸收池的使用方法，儀器的預熱等） 的解決方法，波長(cháng)準確度的檢驗和矯正.

引言

紫外分光光度計，是根據物質(zhì)的吸收光譜來(lái)研宄物質(zhì)的 結構、成分和物質(zhì)間相互作用的有效手段。此光度計可以在 紫外可見(jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光。通過(guò)每種物質(zhì)*的、 固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上某些特征波長(cháng)處的 吸光度高低判別或測定該物質(zhì)的含量。而在日常生活和生產(chǎn) 過(guò)程中，難免會(huì )出現些問(wèn)題，接下來(lái)就常見(jiàn)的一些問(wèn)題進(jìn)行 探討。

1.紫外可見(jiàn)分光光度計檢定常見(jiàn)問(wèn)題的探討

雜散光問(wèn)題:雜散光的存在使紫外可見(jiàn)光純度會(huì )降 低，從而使檢測的誤差增大。雜散光使紫外分光光度計的準 確性己經(jīng)不正確。雜散光的產(chǎn)生與整臺儀器有著(zhù)密不可分的 關(guān)系，可能由于光敏部位的密封不嚴，光學(xué)元件的錯位、損 壞、不潔凈、老化有關(guān)。

解決雜散光的對策：由于該光度計計的光敏元件是十分 靈敏，要想保持元件的溫度正常則必須進(jìn)行必要的散熱， 然而通過(guò)散熱，空氣中的灰塵會(huì )從散熱孔中吸入從而在光敏 元件上進(jìn)行附著(zhù)，灰塵的附著(zhù)會(huì )使雜散光超差。解決這些灰 塵，使用酒精擦拭可以解決，使用吹風(fēng)機進(jìn)行吹干防止酒 精的殘留。由于反光鏡的制作具有特殊性，軟膜鍍于表面， 所以只能采用火棉膠進(jìn)行除塵，這樣才能保持鍍于表面的 軟膜不被破壞。另一個(gè)容易引起雜散光超差的原因是紫外可 見(jiàn)光光度計元件的位移。一是由于準直鏡導致，修復此故障 需要進(jìn)行調節準直鏡的螺母，調節到誤差消除，直到達到 檢定要求。二是由于聚焦失常，由于聚光鏡和光源燈錯位， 使光斑中出現雜色或者光暈在光斑中出現。這時(shí)需要調整焦 距與光源的位置直至出現一半光斑，純凈且均勻，此時(shí)說(shuō) 明調整完成，固定好光源位置便可

基線(xiàn)平直度的問(wèn)題：在紫外可見(jiàn)光光度計中基線(xiàn) 平直度作為主要的技術(shù)參數，十分重要。由于基線(xiàn)平直度、 漂移和噪聲此三者的綜合作用，讓紫外可見(jiàn)分光光度計性 能突出。當基線(xiàn)平直度的超出誤差范圍時(shí)，扭曲值和假峰值 便會(huì )在光度計圖譜上出現，從而大大降低光度計的準確性。

解決基線(xiàn)平直度的對策：使基線(xiàn)平直度超差的原因可能 是光的散射，光敏元件被污染等等，通過(guò)對光學(xué)軟件的雜質(zhì) 進(jìn)行清理來(lái)進(jìn)行基線(xiàn)平直度的調修。如果發(fā)現在光源切換時(shí) 基線(xiàn)發(fā)生較大跳動(dòng)時(shí)，需要通過(guò)光源的檢查與校正來(lái)解決此 問(wèn)題。當儀器使用長(cháng)時(shí)間以后，要及時(shí)得到進(jìn)行保養與維修 來(lái)進(jìn)行基線(xiàn)平直度的消除。同時(shí)通過(guò)穩壓器的安裝來(lái)確保電 壓的穩定。

2.儀器預熱問(wèn)題的討論

關(guān)于儀器的預熱，一般分光計光度計的說(shuō)明書(shū)上 的要求大約為20分鐘；如果是帶微處理器的分光光度計， 儀器開(kāi)機后大約有10分鐘的左右時(shí)間進(jìn)行自檢。而就在分 光計的預熱過(guò)程中，會(huì )存在這樣那樣的問(wèn)題，例如：認為儀 器的初始化過(guò)程便是加熱過(guò)程，開(kāi)機只預熱電路系統。

預熱的目的：通過(guò)進(jìn)行儀器的預熱，是儀器達到的使用過(guò)程，使得數據的測量更加穩定與準確。通過(guò)儀 器的預熱，會(huì )使光路系統處于穩定的狀態(tài)，使電子元件（電 容、電阻）的穩定。

預熱的正確方法：1、對于一般的分光光度計，通 電后，調節測定選擇靈敏檔及波長(cháng)值，在光路上放置一個(gè)吸 收池，將吸收池中裝上純水，調“ 0%T”及“ 100%T” 后，將 吸收池的暗箱蓋蓋上，將儀器預熱大約20分鐘，當儀器所 顯示的讀數不再變化后便進(jìn)行測定。2.對于帶有微處理器有 自檢功能的分光光度計，開(kāi)機儀器進(jìn)行自檢結束后，將所需 的波長(cháng)值在測定窗口上進(jìn)行設置，同樣將裝有純水的吸收池 放置與光路上，調“0000A”后，將儀器進(jìn)行預熱，當儀器 所顯示的讀數不再發(fā)生變化后進(jìn)行測定。

由于紫外可見(jiàn)分光光度計具有雙光源，為了燈的使用壽 命，開(kāi)機自檢結束后關(guān)掉不需要使用的光源。

3.分光光度計檢定中的誤差分析

由于檢測方法的不當引起的誤差：連續法經(jīng)常使 用于對于波長(cháng)示值得檢測，此方法是通過(guò)對連續的驅動(dòng)波 長(cháng)的檢測，利用儀器自身的投射比示值的變化來(lái)測試。這種 檢測方法會(huì )使測得的光譜產(chǎn)生很大的影響（由于光譜曲線(xiàn)的 影響），這種方法終經(jīng)實(shí)踐后被否定。根據JJG178-2007 的規定，可以使用逐點(diǎn)法。逐點(diǎn)法是可以保證數據準確性的 一種方法，該方法可以將儀器的波長(cháng)大限度的反映出來(lái)。 按照該方法規定的要求進(jìn)行檢測便可以減少誤差的產(chǎn)生。

由于檢測的環(huán)境的不符合所造成的誤差：當進(jìn)行 物質(zhì)的檢測時(shí)，可能受到檢測的環(huán)境的影響，環(huán)境的不符合 會(huì )造成誤差。例如：若未對分光光度計進(jìn)行處理（即密封處 理），或者儀器的密封性不是很好，會(huì )讓強光直接照射光源 系統，從而使雜散光減少，使檢測結果產(chǎn)生誤差。如果環(huán)境 中含有較多的灰塵，會(huì )使灰塵沾染到濾光片，從而產(chǎn)生誤差。

4.波長(cháng)準確度的檢查與矯正 在平常使用分光光度計時(shí)，并不需要進(jìn)行儀器波長(cháng)準確 度的檢查。若在平常測定中發(fā)現靈敏度下降，此時(shí)才需要進(jìn) 行檢查，簡(jiǎn)單的檢查方法是當儀器開(kāi)機后，將波長(cháng)調節為 580nm，將一張白紙插入到吸收池座的通光道中，如果有一 長(cháng)方形的黃色光斑出現在白紙上，這就說(shuō)明該波長(cháng)準確度是 在正常的范圍，如果未出現，則需要進(jìn)行波長(cháng)矯正。如果儀 器在長(cháng)途搬運后，如果更換光源的燈泡或者受到機械振動(dòng)以 后，則要進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢查和矯正。矯正的方法有：利 用氪燈的特征發(fā)射線(xiàn)矯正法，干涉濾光片法等。

5.結論

綜上，當我們使用紫外可見(jiàn)分光光度計的檢定過(guò)程中， 一定要遵循說(shuō)明書(shū)的操作過(guò)程，以及規定的相關(guān)的工作規范， 同時(shí)注意保持相關(guān)的環(huán)境，盡量制造少塵的、甚至無(wú)塵的環(huán) 境來(lái)進(jìn)行紫外可見(jiàn)分光光度計的校檢，同時(shí)，當我們在分光 光度計的日常使用和操作過(guò)程中，對儀器的日常維護是必不 可少的，若我們長(cháng)期不使用分光光度計，需要進(jìn)行除潮的操 作，定時(shí)進(jìn)行開(kāi)機，如:在半個(gè)月的進(jìn)行通電預熱15分鐘， 讓分光光度計保持在干燥的狀態(tài)。當紫外可見(jiàn)分光光度計的 氪燈使用的時(shí)間接近或者超過(guò)了 500h的壽命，燈能量降低 到甚至通不過(guò)檢查，此時(shí)，我們需要換新燈進(jìn)行解決。我們 在日常使用過(guò)程中，同時(shí)需要保持溫度的恒定，來(lái)營(yíng)造一個(gè) 適合紫外可見(jiàn)分光光度計工作的環(huán)境。