分光光度計是理化分析中常用的儀器。它的基本原理是建立在光與物質(zhì)相互作用的基礎上，當光子和某一溶液中吸收輻射的物質(zhì)分子相碰撞時(shí)，就發(fā)生吸收，測量其吸光度值的大小可反映某種物質(zhì)存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關(guān)系，這就是的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光（單一波長(cháng)光）照射樣品。為了使該定律具有良好的線(xiàn)性，對測量濃度有一定的范圍要求。
　　分光光度計使用方法步驟：
　　1)預熱儀器。為使測定穩定，將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi)，使儀器預熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續光照。預熱儀器時(shí)和在不測定時(shí)應將比色皿暗箱蓋打開(kāi)，使光路切斷。
　　2)選定波長(cháng)。根據要求，轉動(dòng)波長(cháng)調節器，使指針指示所需要的單色光波長(cháng)。
　　3)固定靈敏度檔。根據有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測量固定在“1”檔。
　　4)調節“0”點(diǎn)。輕輕旋動(dòng)調“0”電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的，光路被切斷，光電管不受光照)。
　　5)調節T=100%。將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的*格內，有色溶液放在其它格內，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉動(dòng)光量調節器，使透光度T=100%，即表頭指針恰好指在T=100%處。
　　6)測定。輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A。讀數后，打開(kāi)比色皿暗箱蓋。
　　7)關(guān)機。實(shí)驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。