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    熒光分光光度計操作規程
    更新時(shí)間:2018-01-26 點(diǎn)擊次數:16218

    1. 開(kāi)機

    a. 確認所測試樣液體或固體,選擇相應的附件。

    b. 先開(kāi)啟儀器主機電源,預熱半小時(shí)后啟動(dòng)電腦程序RF-530XPC,儀器自檢通過(guò)后,即可正常使用。

    2. 測樣

    (1) spectrum模式

    a. 在“Acquire Mode”中選擇“Spectrum”模式。

    · 對于做熒光光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數設置如下:

    “Spectrum Type”中選擇Emission;給定EX波長(cháng);給定EM的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”完成參數的設定。

    · 對于做激發(fā)光譜的樣品,“Configure”中“Parameters”的參數設置如下:

    “Spectrum Type”中選擇Excitation;給定EM波長(cháng);給定EX的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”,完成參數的設定。

    b. 在樣品池中放入待測的溶液,點(diǎn)擊“Start”,即可開(kāi)始掃描。

    c. 掃描結束后,系統提示保存文件??稍?ldquo;Presentation”中選擇“Graf” “Radar” “Both Axes Ctrl+R”來(lái)調整顯示結果范圍;在“Manipulate” 中選擇“Peak Pick”來(lái)標出峰位,zui后在“Channel”中進(jìn)行通道設定。

    d. 述操作步驟對固體樣品同樣適用。

    (2) Quantitative模式

    a. 在“Acquire Mode”中選擇“Quantitative”模式。

    b. “Configure”中“Parameters”的參數設置如下:

    Method 選擇“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中選擇 “1st和“No” ;給定EX、EM波長(cháng);設定狹縫寬度,點(diǎn)擊“OK”,完成參數的設定。

    c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執行“Auto Zero” 命令校零點(diǎn)。

    d. 點(diǎn)擊“Standard”模式,制作工作曲線(xiàn)。

    e. 將樣品池中的空白溶液換成一系列的已知濃度的樣品標準溶液進(jìn)行測量,執行“Read”命令,得到相應的熒光強度,系統根據測量值自動(dòng)生成一條“熒光強度-濃度”曲線(xiàn)。

    f. 在“Presentation” 中選擇“Display Equation”,得到標準方程。將此工作曲線(xiàn) “Save”為擴展名為“.std”的文件。

    g. 工作曲線(xiàn)制備完畢,即可進(jìn)入未知樣的測量,選擇進(jìn)入“Unknown”模式,將樣品池中的已知濃度標準溶液換成待測樣品溶液,執行“Read”命令,即可得到相應的熒光強度和相應的濃度。將此 “Save”為擴展名為“.qnt”的文件。

    (3) Time Course模式

    a. 在“Acquire Mode”中選擇“Time Course”模式。

    b. “Configure”中“Parameters”的參數設置如下:

    給定EX、EM波長(cháng);設定狹縫寬度;設定反應時(shí)間;讀取速度;讀取點(diǎn)數;

    點(diǎn)擊“OK”,完成參數的設定。

    c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執行“Auto Zero” 命令校零點(diǎn)。

    d. 將樣品池中的空白溶液換成待測溶液,點(diǎn)擊“Start”,即可開(kāi)始掃描。掃描結束后,即可得到熒光強度對時(shí)間的工作曲線(xiàn)。

    e. 將此工作曲線(xiàn)“Save”為擴展名為“.TMC”的文件。

    3. 關(guān)機

    退出軟件后關(guān)畢主機。

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