分光光度計檢定中應注意的問(wèn)題

JJG178-2007《紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計》檢定規程將 JJG178-1996《可見(jiàn)分光光度計》、JJG375-1996《單光束紫外-可見(jiàn)分光光度計》、JJG682-1990《雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計》、JJG689-1990《紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計》4個(gè)規程合并為一個(gè)規程。合并工作主要從與建議接軌、適應現代化儀器發(fā)展的需要、減少規程數量、易于操作等方面出發(fā)，對 4個(gè)規程的檢測方法、指標要求、操作步驟等進(jìn)行了整合。合并后的新規程涵蓋了所有類(lèi)型分光光度計檢定的有關(guān)事項及計量技術(shù)指標，其較全面、詳盡的規定了檢定的有關(guān)內容。針對一些環(huán)境條件好，操作人員素質(zhì)高的單位，檢定員按規程檢定，一般不會(huì )有問(wèn)題，但對一些廠(chǎng)礦企業(yè)，或在儀器使用環(huán)境較差、人員素質(zhì)普遍較低的情況下，檢定人員應注意一些問(wèn)題。

1 檢定前，應粗略檢查儀器波長(cháng)

分光光度計分析測量原理基于朗伯-比爾定律，其數學(xué)

表達式為 A =-1g(I/I0)= KLC

式中： A —物質(zhì)的吸光度；I —透射的單色光強度；

I0—入射的單色光強度；K —物質(zhì)的吸光系數；L —被分析物

質(zhì)的光程；C —物質(zhì)濃度。

朗伯-比爾定律適用的前提條件是單色光。從上式中可以看出，波長(cháng)變化，將直接影響吸光度及物質(zhì)濃度的變化。

由此可見(jiàn)，光的波長(cháng)示值誤差在分光光度計檢定與使用中的

重要性。針對某些廠(chǎng)礦企業(yè)實(shí)驗室環(huán)境條件差、儀器使用頻

繁、易搬動(dòng)、易出現故障的情況，檢定前，應先粗略檢查儀

器的光路，若無(wú)大問(wèn)題，可進(jìn)一步按照規程進(jìn)行檢定，若不

符要求，可調試后再檢定，這樣可以提高工作效率，達到事

半功倍的效果。具體方法如下：

將儀器波長(cháng)置于 580nm處，狹縫置于 2nm處，開(kāi)啟鎢燈電源開(kāi)關(guān)，打開(kāi)試樣室蓋，用一張白紙插入參比光路或樣品光路中央，應在白紙上看到一個(gè)清晰、明亮、完整的橙黃色光斑，再打開(kāi)氫燈，與上述方法一致，應看到一個(gè)亮度較暗的橙黃色光斑，當手調波長(cháng)至長(cháng)波方向時(shí)，應看到光斑顏色由黃變紅，接著(zhù)當手調波長(cháng)至短波方向時(shí)，應看到光斑顏色由紅變黃并向紫色變化。若儀器波長(cháng)檢測能順利完成，則說(shuō)明儀器光學(xué)系統基本正常，波長(cháng)示值誤差在 2nm范圍以?xún)取?/span>

 2 儀器波長(cháng)調整后，一定要告知對方操作員

在定量分析中，許多企業(yè)的一線(xiàn)分析仍是采用標準曲線(xiàn)法。它是基于求得一組標準溶液所對應的吸光度與被測樣品的吸光度進(jìn)行比較，而得到被測物含量的一種方法，也是zui經(jīng)典的方法。在檢定中，如果發(fā)現儀器波長(cháng)示值誤差，經(jīng)調整后，儀器各項計量指標均符合 JJG178-2007的要求，檢定人員應告知對方使用人員重新繪制標準曲線(xiàn)，否則檢測結果將出現較大偏差。因為原標準曲線(xiàn)是在波長(cháng)調整前繪制的，現在波長(cháng)調整了，與原來(lái)相比吸光度將隨之發(fā)生變化，因此

需要從新配置系列標準曲線(xiàn)，繪制新的標準曲線(xiàn)。

 3 分光光度計透射比檢定過(guò)程中應注意的問(wèn)題

分光光度計的透射比在檢定過(guò)程中經(jīng)常會(huì )出現透射比示值超出規程要求的情況，那么這種狀況由何而起呢，經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗，認為分光光度計透射比準確度示值誤差超差的原因大致如下：

3.1 波長(cháng)示值誤差超差

在檢測儀器時(shí)一般先進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢定，按要求將儀器波長(cháng)調至合格，再進(jìn)行透射比檢測即可解決波長(cháng)示值誤差超差問(wèn)題。

3.2 檢測器光門(mén)桿組件損壞

有些儀器在合上檢測室蓋板后，利用蓋板打開(kāi)檢測器光門(mén)，長(cháng)時(shí)間使用后會(huì )使光門(mén)組件損壞，使光門(mén)處于半開(kāi)和狀態(tài)，用手輕壓蓋板，儀器示值會(huì )發(fā)生明顯變化，由于光門(mén)位置開(kāi)合的不重復性導致透射比示值的重復性超差。此時(shí)對光門(mén)組件進(jìn)行調整使光門(mén)能夠*打開(kāi)，問(wèn)題即可解決。

3.3 光源的光譜帶寬發(fā)生變化

分光光度計要求必須是一定的單色光，且每種儀器都應具有一定的光譜帶寬。一些儀器在使用或修理的過(guò)程中，有些非專(zhuān)業(yè)人員可能會(huì )誤對儀器的出射狹縫進(jìn)行調整，從而導致儀器的光源單色性純度不夠，影響到儀器的透射比準確度。

遇到這類(lèi)問(wèn)題，檢測人員應與儀器的使用人員進(jìn)行必要的溝通，詢(xún)問(wèn)儀器的使用或修理過(guò)程，然后按照儀器的技術(shù)參數對狹縫進(jìn)行重新調整，直到光譜帶寬符合要求為止。

3.4 檢測器的光電線(xiàn)性度不夠

儀器要求檢測器具有一定的光照線(xiàn)性范圍，但是，檢測器在使用中會(huì )出現鈍化現象，用的越久現象越嚴重，在低透射比時(shí)正常，而在高透射比時(shí)會(huì )表現出明顯的超差。遇到這類(lèi)問(wèn)題只有更換檢測器。

3.5 儀器顯示裝置發(fā)生問(wèn)題

對一些使用指示類(lèi)表頭的儀器，由于指針軸長(cháng)期磨損使儀器靈敏度失靈，會(huì )發(fā)生卡滯現象，死區增大，手指輕敲，指針還會(huì )發(fā)生相應偏移。遇到這類(lèi)問(wèn)題只有更換新的表頭。

3.6 比色皿架位置發(fā)生偏移

比色皿架在工作中經(jīng)常運動(dòng)，發(fā)生位置偏差時(shí)光束不能*透過(guò)比色皿射入檢測器，而射在比色皿的邊緣部位，導致有效光能損失而使透射比失準。此時(shí)可對比色皿架底座的前后位置進(jìn)行調整，使光束正好從比色皿架中央通過(guò)即可。

3.7 比色皿使用不當

在對分光光度計進(jìn)行檢測時(shí)，要注意空白的石英比色皿在紫外區沒(méi)有吸收（或吸收較?。?，而玻璃比色皿在紫外去吸收較大，如果錯拿，則會(huì )給分析結果帶來(lái)粗大測量誤差。

另外，檢定人員也不要忽略對儀器配套使用的比色皿成套性的檢定，這也是造成儀器分析結果偏離的一個(gè)重要因素。主要是由于操作人員用于盛放參比溶液和樣品溶液的比色皿基本固定不變，從而造成盛放樣品的比色皿由于污染程度相對嚴重而使比色皿顏色變深，久而久之，兩個(gè)比色皿透射比出現較大誤差。對于這種情況，應告知操作人員，比色皿位置并非固定不變，可前后互置，并經(jīng)常清洗，保證其成套性

誤差在 0.5%以?xún)确娇沙商资褂谩?/span>

綜上所述，只是筆者作為檢定員在檢定過(guò)程中一些經(jīng)驗的總結。當然，作為一名檢定員不僅應該透徹了解檢定規程的每一條款，熟練操作儀器，還要多學(xué)習一些與分析相關(guān)的基本知識技能以及理論。這樣，在實(shí)際工作中才能更好的服務(wù)企業(yè)，幫助企業(yè)解決實(shí)際困難。