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    紫外可見(jiàn)分光光度計檢定中的誤差控制
    更新時(shí)間:2017-03-20 點(diǎn)擊次數:2789

    紫外可見(jiàn)分光光度計檢定中的誤差控制

    紫外可見(jiàn)分光光度計是通過(guò)測定被測物質(zhì)在特定波長(cháng)處或一定波長(cháng)范圍內光的吸收度,對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。在生物制藥、精細化工、環(huán)境監測等領(lǐng)域有著(zhù)廣泛應用,紫外分光光度計的準確性直接關(guān)系到實(shí)驗的準確性和有效性。因此對于示值誤差的檢定是否準確具有至關(guān)重要的作用,本文將講述如何控制在檢定過(guò)程中對儀器示值誤差的控制。

    1 紫外可見(jiàn)分光光度計檢定中存在的誤差

    1.1 檢定用濾光片對光的反射引起的誤差

    這種現象主要發(fā)生原因是金屬涂層過(guò)濾器的傳輸比誤差,但目前所用的金屬涂層過(guò)濾器的表面是光產(chǎn)生一定反射的入射光,引起測量誤差,特別是在使用光學(xué)透鏡的現象時(shí),采用低紫外分光光度計測試。而且有測量性能的不穩定問(wèn)題的金屬涂層過(guò)濾器,過(guò)濾器表面是一層涂層,涂層表面如果污染,清洗容易造成損壞的涂層,改變原來(lái)的數值濾波器。解決方案:使用金屬涂層的紫外濾光片透過(guò)率的誤差測試,使用中性密度濾光片的分段誤差檢定的可見(jiàn)光透過(guò)率,發(fā)現只有紫外線(xiàn)透過(guò)率的誤差部分不合格,用標準溶液進(jìn)行復測,測試結果作為zui后的驗證結果的紫外線(xiàn)透過(guò)率的誤差標準溶液。

    1.2 雜散光與透射比的誤差

    紫外-可見(jiàn)分光光度計的理論依據是郎伯-比爾定律,郎伯-比爾定律只有在采用單一波長(cháng)時(shí)才能成立,雜散光是將不同波長(cháng)的光投射到光檢測器上的總和的總和。雜散光被引入到測量誤差和雜散光的值基本上是相同的,例如:如果一個(gè)儀器的雜散光是 1%,那么由雜散光引入的測量誤差也約等 1%。產(chǎn)生雜散光的主要原因有:(1)灰塵、水污染或發(fā)霉的光學(xué)元件;(2)光學(xué)元件位置的變化或損壞;(3)與復合光泄漏引起。所測樣品的透射比為負,吸光度之間的關(guān)系也就是 a - logt,使傳動(dòng)比誤差直接影響測量數據的準確性。

    4)紫外分光光度計中大入射光斑的問(wèn)題。大量的單光束紫外可見(jiàn)分光光度計被包含在激光束的較大光斑中,并且在測試中使用了濾波器,并且光的一部分被濾波器的支架邊緣阻擋。解決方案:利用空氣作為參考,調整 100%分光光度計的傳動(dòng)比,安裝不支持空白濾波器插入比色皿。

    1.3 雜散光的問(wèn)題

    儀器的檢測靈敏度與可靠性一般取決于紫外可見(jiàn)分光光度計的雜散光指標。如果雜散光較大,不僅能直接將小吸收峰淹沒(méi),導致光譜圖線(xiàn)條出現不光滑、不連續的情況,同時(shí)儀器的測光準確度也會(huì )因此受到影響。雜散光主要是指在所有到達接收器中的光中,除了規定波長(cháng)之外的其他波長(cháng)的光,一般有 2種出現形式:一是測量波長(cháng)和雜散光波長(cháng)相同,會(huì )直接射到檢測器上,而沒(méi)有經(jīng)過(guò)樣品。造成這種情況的主要原因是樣品與 其他光學(xué)機械零件的散射及反射。二是雜散光是測定波長(cháng)之外的偏離正常光路到達檢測器的光線(xiàn),這是因光學(xué)系統本身缺陷導致的,比如灰塵散射、光學(xué)系統像差、光學(xué)表面差痕、多余反射面、以及光束孔徑不匹配等。

    在檢定雜散光時(shí)一般使用標準濾光片法與標準溶液法,其中標準濾光片法在實(shí)際檢定中運用較多。在光譜透光率的檢測器靈敏度較低、光強強度較弱時(shí),會(huì )加大雜散光比例,因此,首先應該對紫外分光光度計中(200220nm區域內的雜散光進(jìn)行檢定。

    1.4 基線(xiàn)平直度問(wèn)題

    基線(xiàn)平直度反映的是每個(gè)波長(cháng)上的光度噪聲,重要的技術(shù)指標之一,同時(shí)也是主要分析誤差的來(lái)源之一,它決定紫外可見(jiàn)分光光度計在各個(gè)波長(cháng)下的分析檢測濃度的下限。影響基線(xiàn)平直度的因素很多,例如:濾光片或光學(xué)元器件上有灰塵,會(huì )產(chǎn)生散射,從而引起基線(xiàn)平直度變壞;濾光片未安裝好,用于不同波段不同的濾色片切換時(shí)會(huì )產(chǎn)生噪聲,使基線(xiàn)平直度變壞;氘燈和鎢燈切換時(shí)產(chǎn)生噪聲;掃描速度太快也會(huì )引起平直度變壞等。

    2 紫外可見(jiàn)分光光度計檢定誤差控制

    1)應加強計量檢定人員計量法律法規的學(xué)習,做到依法辦事,客觀(guān)公正,保持強烈的責任心,嚴謹細致,保證數據準確可靠;加強檢定人員對檢定規程的學(xué)習,理論實(shí)際,總結工作中的經(jīng)驗和教訓,積極提升檢定技術(shù)水平和數據處理業(yè)務(wù)水平,避免或減少檢定誤差的產(chǎn)生;了解和關(guān)注檢定技術(shù)新動(dòng)態(tài),提高測量準確度。

    2)保證適合開(kāi)展紫外可見(jiàn)分光光度計檢定的良好的環(huán)境條件。進(jìn)行檢定前,應先對環(huán)境條件實(shí)施監控,只有當環(huán)境參數滿(mǎn)足規程要求時(shí),才可開(kāi)展檢定工作。惡劣環(huán)境下,不宜開(kāi)展檢定工作。

    3)應將濾光片定期送檢,以保證其定值的準確性、有效性和溯源性;指示標準濾光片以固定的方向定值和檢定;根據規程要求,核查濾光片的穩定性,超出穩定性范圍應更換;注意保持濾光片清潔,保證檢定結果準確可靠。4)應根據檢定規程,對各個(gè)技術(shù)指標使用正確的檢定方法進(jìn)行檢定;依據紫外可見(jiàn)分光光度計的原理特點(diǎn)使用合理的檢定程序,避免因儀器固有結構設計引入誤差。

    以上主要介紹了在檢定紫外分光光度計在檢定過(guò)程中容易對示值誤差產(chǎn)生影響的原因,同時(shí)在檢定過(guò)程中細微的疏忽也會(huì )對檢定結果有一定的影響。此外,有必要注意電源電壓適應性和池匹配的影響,分析錯誤的原因,找出解決方案。同時(shí),在使用紫外分光光度計的過(guò)程中,還要做好儀器的日常維護工作,只有做好各方面工作,才能保證紫外分光光度計保持*工作狀態(tài)。

     

     

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